智能制造是一種基于數(shù)字化技術(shù)和智能化設(shè)備的生產(chǎn)方式，通過(guò)采用先進(jìn)的制造技術(shù)和設(shè)備，實(shí)現(xiàn)生產(chǎn)過(guò)程的自動(dòng)化、智能化和數(shù)字化。智能制造的應(yīng)用可以提高生產(chǎn)效率和產(chǎn)品質(zhì)量，減少人工成本的浪費(fèi)，提高企業(yè)的競(jìng)爭(zhēng)力。

WOLF柔性單細(xì)胞分選儀是一種溫和的低壓（<2 psi）微流控細(xì)胞分選儀。使用低壓細(xì)胞分選儀可以降低細(xì)胞上的剪切應(yīng)力，從而使細(xì)胞更健康、更完整、活率更高，分選后的RNA完整性更高。WOLF還使用可拋棄式分選芯片，使樣品和鞘液接觸的所有東西都是無(wú)菌的，一次性的，并且不受樣品間污染。為了證明這種溫和的無(wú)菌細(xì)胞分選儀如何10x基因組學(xué)工作流程中的有時(shí)，我們將未分選的iPSC樣品制備與在NanoCellect WOLF或BD FACSAria?II上分選的iPSC樣品進(jìn)行了比較。

下圖為兩種儀器的圈門(mén)流程，圈門(mén)的基本邏輯相同，而由下圖可知兩種儀器所圈的目標(biāo)細(xì)胞占比大致相同。

我們將有關(guān)樣品RNA和測(cè)序質(zhì)量的幾個(gè)關(guān)鍵指標(biāo)進(jìn)行了對(duì)比。WOLF分選的樣本“Median UMI Counts per Cell”比未分選的樣本（4668）增加了近7倍（32239），比BD FACSAria II分選的樣本（14949）增加了2倍（下圖A）。對(duì)于“Median Genes per Cell”觀察到類(lèi)似的結(jié)果，其中WOLF比未分選的細(xì)胞增加了3倍，而B(niǎo)D FACSAria II分選的樣品僅比未分選的細(xì)胞多2倍（下圖B）。這些結(jié)果表明，從樣品中去除碎片和死細(xì)胞后，文庫(kù)的復(fù)雜性更高。我們?cè)谒腥N情況下都發(fā)現(xiàn)了相似數(shù)量的“Total Genes Detected”（下圖C），這可能是由于采樣如此多細(xì)胞的上限效應(yīng)。最后，“%Reads Mapped to Transcriptome”顯示了唯一映射到特定基因的讀數(shù)的百分比。低百分比可能表明存在無(wú)法明確定位的片段化RNA。我們的結(jié)果顯示，分選后，Aria（65.8%）和WOLF（68.8%）中能夠映射到參考轉(zhuǎn)錄組的reads百分比有所提高（下圖D）。

該實(shí)驗(yàn)表明，在10x基因組學(xué)應(yīng)用程序的上游使用細(xì)胞分選儀可以提高文庫(kù)的復(fù)雜性。盡管在WOLF和Aria分選的樣本中，文庫(kù)的復(fù)雜性都得到了改善，但顯然WOLF的改善更為顯著，可以幫助我們獲得更多的數(shù)據(jù)。此外，即使這些結(jié)果表明檢測(cè)到的基因數(shù)量相似，但仍有較高的能夠映射到參考轉(zhuǎn)錄組的reads的百分比。這表明分選的樣品中污染較少，數(shù)據(jù)的可信度更高。

總之，這些結(jié)果表明，WOLF是一個(gè)功能完備的柔性細(xì)胞分選儀，是10x基因組學(xué)研究中的強(qiáng)大助力。