在生物醫學研究的前沿，稀有細胞的分離與分析一直是科研人員面臨的挑戰。NanoCellectBiomedical,Inc.憑借其創新技術，為這一難題提供了解決方案。MARS®聲學技術和WOLF細胞分選儀的結合，為從全血中高效、溫和地富集和分離稀有細胞開辟了新途徑。
WOLF細胞分選儀：基于微流體的分選技術，配備強大的激光激發。WOLF的微流體通道比任何傳統細胞分選器都要溫和，允許以提高的細胞活性進行細胞分選。直觀的儀器設計，固定光學系統無需流體車，減少復雜性，減少清潔工作，讓實驗更高效。
MARS®聲學技術：利用主動微流體聲學技術，無需標記即可根據物理參數差異分離樣本顆粒。這一技術能夠在無需手動PBMC準備的情況下，從外周全血或骨髓中富集稀有細胞，且控制過程帶來前所未有的恢復率。
MARS®與WOLF協同優勢：當MARS®和WOLF技術相結合時，它們在從全血或骨髓中富集和分離稀有細胞方面展現出了卓越的性能。其靈敏度提高了100倍，稀有細胞的富集倍數可達4200倍，這一數據足以證明該組合技術在稀有細胞研究領域的強大實力。
血液樣本處理：首先，取3mL全血樣本，在其中加入特定比例的A549細胞進行“加標”（spike-in）操作，本次實驗設置了不同的加標比例，分別為0.02%、0.25%和0.99%，以此來模擬不同濃度的稀有細胞情況。此外，向血液樣本中加入FcRBlock和CD45PE抗珠試劑。
在加入試劑后，對樣本進行裂解處理，裂解完成后，進行離心操作，進一步純化樣本，為后續的分選做好準備。
經過MARS®處理后的樣本，接著使用WOLF細胞分選儀進行分選。WOL根據預設的參數將目標細胞從樣本中進行分選，以上工作流程如圖1所示。
圖1.MARS®-WOLF協同工作流程圖.流程提供了溫和，靈活和容易的稀有細胞分離。
1、在不同加標比例的實驗中，從最初0.02%加標比例的樣本開始，經過一系列處理，最終A549細胞的純度達到了43.3%；當加標比例為0.25%時，分選后的純度更是高達98.5%；而在0.99%加標比例下，純度也能達到96.2%（如圖2所示）。這一結果表明，無論稀有細胞的初始濃度如何，該技術組合都能有效地將其富集并提高純度。
圖2.MARS®和WOLF細胞分選工藝顯著提高了稀有靶細胞的純度。細胞分離從初始(A)0.02%峰入到最終純度43.3%,(B)0.25%峰入到純度98.5%,(C)0.99%峰入到純度96.2%。每次試驗處理全血3mL。
2、在另一個以0.01%加標比例進行的實驗中，經過MARS®-WOLF技術的富集和分離，A549細胞的最終濃度從初始的較低水平提高到39.8%（如圖3所示）。這一結果不僅體現了該技術對稀有細胞的有效富集，同時也反映了其在細胞回收方面的出色性能。
圖3.MARS®和WOLF稀有細胞分離從最初的0.01%到最終的39.8%。
3、細胞活性方面，MARS®和WOLF技術同樣表現優異。如圖4（B）所示，實驗數據表明在整個處理過程中，A549細胞的存活率始終保持在較高水平。在經過MARS®平臺富集后，細胞存活率為95.0%；而在WOLF分選后，存活率仍能達到95.3%，這充分證明了該技術組合在處理過程中對細胞的溫和性，能夠有效地保護細胞免受損傷，確保細胞在分選后的活性和功能完整性。
圖4.(A)利用MARS®平臺從全血中富集A549細胞。(B)MARS®和WOLF儀器均可確保高細胞活力。n=3的實驗。
MARS®和WOLF技術的應用范圍廣泛，不僅適用于上述實驗中的A549細胞，還能夠對多種稀有細胞進行高效的富集和分選。例如，在癌癥研究中，可用于循環腫瘤細胞（CTCs）和多藥耐藥細胞（MDRs）的分離，這對于深入了解癌癥的發生發展機制、藥物耐藥性研究以及癌癥的早期診斷和治療具有重要意義；在免疫研究領域，能夠分離抗原特異性T細胞，為免疫治療的研究和開發提供有力支持；此外，對于造血干細胞、漿細胞等的分選也同樣高效，為血液系統疾病的研究和治療開辟了新的途徑。
此外，MARS®和WOLF技術的結合為生物醫學研究帶來了諸多便利和創新。其溫和的分選方式、高靈敏度、高細胞回收率以及高純度的分選結果，使得稀有細胞的研究能夠更加深入和精準。在疾病診斷方面，能夠幫助我們更早期、更準確地發現疾病相關的稀有細胞變化，為疾病的早期診斷提供可能；在治療領域，為個性化醫療提供了重要的技術支持，例如通過精確分選患者體內的特定細胞類型，實現更精準的靶向治療。同時，該技術的高效性和易用性也將大大推動相關領域的研究進展，讓科研人員能夠在更短的時間內獲得更可靠的研究結果，加速科研成果向臨床應用的轉化。
