由于源自人類細胞，HEK293T細胞系在生物治療蛋白質生產中的應用日益廣泛，但轉染后常變得極為脆弱。WOLF細胞分選儀與N1單細胞分配器提供了一套溫和的分選平臺，可高效分選并分裝單個轉染細胞，從而實現高產、靶向的單克隆細胞生長與生產。
有限稀釋法或低通量分選技術及細胞打印機無法篩選轉染細胞群體，且部分方法可能對細胞造成損傷。傳統流式細胞分選儀雖能解決部分問題，但其高壓分選機制對細胞同樣具有損傷性，可能限制細胞生長增殖。本文將展示WOLF和N1系統可成功分選GFP轉染的HEK293T細胞，實現高生長率，且無需特殊耗材或培養條件。
使用WOLF將GFP陽性的HEK293T細胞分選至96和384孔板中年，隨后將分選后的細胞置于37℃、5% CO?的培養箱中靜置培養。第14天使用成像系統進行拍照，并計數GFP陽性克隆（下圖）。
WOLF系統無需專用培養基、培養板或特殊生長條件，即可在兩種培養板中產生>70%的單克隆HEK293T GFP+菌落。平均而言，96孔板中有78%、384孔板中有74%含有GFP+菌落（左下圖）。其中96%的96孔板菌落和97%的384孔板菌落為單克隆（右下圖）。
WOLF柔性單細胞分選儀分選效果顯著超越了有限稀釋法的預期效果。其產生的HEK293T-GFP單克隆長成率遠超無專用培養基細胞打印機<10%的標準值。傳統流式細胞分選儀雖能富集GFP+細胞，盡管所用的是穩定的HEK293T細胞系，但因其高壓力的苛刻分選條件，最終結果可能與細胞打印機相似。
綜上所述，WOLF柔性單細胞分選儀是開發敏感轉染HEK細胞系的理想平臺。
