使用CRISPR基因組編輯技術能夠快速生產(chǎn)患者或健康對照的誘導多能干細胞（iPSC），極大地加速了體外疾病模型系統(tǒng)的產(chǎn)生，用于研究人類疾病機制。然而，在工作流程中仍然存在實質性的限制。在從患者細胞中衍生iPSCs時，可以使用特定的選擇標準從未被重編程的細胞中分離出多能細胞。分化過程可以通過使用特定的標記物來豐富目標細胞。最后，分選經(jīng)過CRISPR編輯的單細胞將提高工作流程的效率。在上述的每一個步驟中，都可以使用柔性流式分選儀進行分選，避免對這些敏感細胞造成傷害。

流式細胞術（FACS）是一種從異質混合物中純化細胞的常用方法，但由于分選條件惡劣，它已被避免用于敏感的iPSCs。傳統(tǒng)液滴分選器的剪切應力、高壓（高達70 psi）和減壓沖擊會對分選后的細胞產(chǎn)生破損死亡，生長能力喪失等負面影響。微流控單細胞分選儀，如NanoCellect的WOLF G2細胞分選機，由于微流控層流、低壓（<2 psi）和無液滴/氣溶膠機制，消除了減壓沖擊，降低了剪切應力，提高了分選后細胞生存能力。

WOLF G2在無菌可拋棄式微流控芯片中檢測和分選未標記或熒光標記的細胞。細胞可以富集分選到標準離心管或5ml流式管，或使用N1單細胞分配器模塊分選單個或多個細胞到96或384孔板。WOLF G2將無菌、柔和的細胞分析分選和單細胞分配整合到一個系統(tǒng)中，大大提高了基因編輯iPSCs的單克隆細胞分選后的活率。

根據(jù)正向和反向散射特性對未標記的細胞進行分類以分離單個細胞（下圖），然后將其分配到matrigel包被的96孔板中。在StemFlex中培養(yǎng)單個iPSC克隆，并在培養(yǎng)液中添加10μM ROCK抑制劑，培養(yǎng)24小時。

使用微流控WOLF G2細胞分選儀和傳統(tǒng)的BD FACSAria II分別將單個iPSCs細胞分選至96孔板，以評估置板率和細胞生長情況。Aria板中的細胞在分選后一周不再存活。相比之下，WOLF G2有14個單克隆長成（下圖）。

除了根據(jù)散射特性分析和分選無標記細胞外，WOLF G2細胞分選儀還可以根據(jù)熒光檢測（如GFP表達和熒光活力染色）進行分析和分選。熒光標記可以用于傳統(tǒng)的質粒轉染（下圖中上），也可以用于使用更高效的CRISPR-Cas9系統(tǒng)的轉染。此外，還可以用染料（如7-AAD）排除死細胞，這種染料標記細胞膜受損的細胞（下圖中下）。

國內外研究成果已經(jīng)證明了體外患者細胞衍生疾病模型的科學價值。隨著這些模型越來越多地被使用，生產(chǎn)方法需要改進，以減少勞動力，提高分選和克隆的效率。利用傳統(tǒng)的FACS儀器對編輯過的單細胞進行分析和分選已被證明只能產(chǎn)生很少或完全沒有用于生長的活細胞，所以是一個不可用的選擇。而WOLF G2細胞分選儀可以使用高活力、無交叉污染的微流控分選來克服這些挑戰(zhàn)，分選出更多能夠使用的iPSCs，是更優(yōu)的選擇。