誘導多能干細胞(iPSCs)與胚胎干細胞(ESCs)在分化和增殖等許多方面具有相同的特性。在科研中,iPSCs比ESCs更具優勢,部分原因是它們不受科學界的倫理約束。山中伸彌(Dr. Shinya Yamanaka)在2006年實現了基于外源因子將體細胞重編程為類似胚胎干細胞的多能狀態。山中的發現促成了當前的iPSC技術;此外,iPSC技術還幫助解決了基礎生物學、再生醫學、藥物發現以及食品科學等領域研究的倫理問題。
誘導多能干細胞(iPSCs)與胚胎干細胞(ESCs)在分化和增殖等許多方面具有相同的特性。在科研中,iPSCs比ESCs更具優勢,部分原因是它們不受科學界的倫理約束。山中伸彌(Dr. Shinya Yamanaka)在2006年實現了基于外源因子將體細胞重編程為類似胚胎干細胞的多能狀態。山中的發現促成了當前的iPSC技術;此外,iPSC技術還幫助解決了基礎生物學、再生醫學、藥物發現以及食品科學等領域研究的倫理問題。
表面抗原的熒光抗體可作為驗證干細胞是否保持多能性的指標,本次實驗中我們使用了細胞表面標記物SSEA-4(Stage-specifi c Embryonic Antigen-4)和TRA-1-60-R(Tumor-related Antigen-1-60),細胞分化后,SSEA-4和TRA-1-60-R的表達都會下調。
分選前,約6%的細胞樣本為死細胞(下圖)。
約69%的細胞對SSEA-4和TRA-1-60-R為陽性(下圖)。
使用SSEA4+TRA160+(右上角象限)門對兩種表面標志物均陽性的細胞進行分選后,雙陽性細胞增加到93%(下圖)。
并且排除掉了大部分死細胞(下圖)。
分選后樣本培養24小時后顯示的單個細胞(下圖A)。培養5天后的iPSC細胞團(下圖B)。
綜上所述,WOLF G2能準確識別和富集用SSEA-4和TRA- 1-60-R兩種表面標記物標記的 hiPSCs,這兩種標記物廣泛用于標記未分化干細胞。使用WOLF G2可以將樣本從69.6%的雙陽占比純化到92.8%,并且純化后的細胞活率高于99%。這表明WOLF G2 對神經科學和疾病建模等干細胞相關應用的科研工作很有幫助。WOLF G2 能溫和地分選和識別如此苛刻和脆弱的細胞類型,也證明了它的高度實用性。

