植物生物學的科研內容包括基因表征和功能、蛋白質組學和轉錄組學、單細胞基因組學、通過基因工程/CRISPR-Cas9編輯改進細胞系開發以及育種等,這些工作流程需要通過溫和的細胞分選方法進行原生質體的分離。

傳統流式分選儀會給樣品極高的壓力、剪切應力、減壓沖擊和滲透變化等,這會損壞原生質體,使其無法用于下游應用,因此用傳統液滴細胞分選儀分選植物原生質體具有挑戰性,會浪費許多珍貴的樣本。傳統細胞分選儀還限制了鞘液的使用,通常只能使用PBS或者其他的指定緩沖液,而這些緩沖液對于在分選期間和分選后原生質體的活性至關重要。
WOLF微流控柔性細胞分選系統采用溫和的分選原理(< 2 psi)和低剪切應力,能有效地單細胞或富集分選目標細胞,并且支持使用培養基作為鞘液來更大程度的保留細胞活力。本文展示了WOLF在分選原生質體上的應用,它成功分離出番茄葉肉細胞原生質體,并顯著提高了分選后的存活率。
分析預分選樣品時,可以看到游離葉綠體,這表明細胞已經裂解(下圖)。分選后,樣品中則多為未損壞的原生質體。WOLF的低壓分選(< 2 psi)與使用原生質體培養基作為鞘提供了成功選的環境。
下圖中的顯微鏡檢圖片展示了成功分選的原生質體不同組群。高葉綠素和低葉綠素原生質體群體的大小范圍相同:30-50 微米;而葉綠體則小得多,約為 10 微米。下圖中,圖A為分選前的樣本,B為分選出的含高葉綠素的原生質體,C為分選出的含低葉綠素的原生質體,D為分選出的葉綠體。
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